WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 11 |

При проведении корреляционного анализа данных КФМ с результатами гемостазиограмм была выявлена достоверная отрицательная корреляция растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК) с клетками покоя и положительная корреляция РФМК с 4 морфологическим типом тромбоцитов (дегенеративно изменнными клетками). Выявление в повышенном количестве компонентов РФМК в плазме крови свидетельствует о тромбинемии, вследствие чего происходит повышение активационного статуса тромбоцитов. Достоверной корелляционной зависимости между уровнем аФЛ и оптико-геометрическими и активационными параметрами тромбоцитов не выявлено, но наблюдается тенденция зависимости уровня иммуноглобулинов класса М и степени активности тромбоцитов: с клетками 2 и 3 типа- прямая, с клетками 1 типа - обратная.

Заключение: учет результатов данных КФМ живых циркулирующих тромбоцитов и традиционных гемостазиологических исследований обеспечивают достаточную степень объективности и информативности при оценке нарушений гемостаза для улучшения диагностики тяжести патологического процесса при обследовании больных с АФС.

Кауров Б.А., Потапова С.Г., Шишина Р.Н.

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ КОРРЕЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ МОРФОЦИТОМЕТРИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЭРИТРОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ И ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ ФГУ Российский геронтологический научно-клинический центр Росздрава, Москва Учитывая, что морфологические характеристики эритроцитов являются ключевым моментом в диагностике любых нарушений эритропоэза, мы провели компьютерное морфометрическое исследование параметров эритроцитов периферической крови у больных с почечной патологией, в частности, хроническим пиелонефритом (ХП), в том числе осложненной почечной недостаточностью (ХПН) и анемическим синдромом.

Целью работы было выявление дополнительных тестов для количественной оценки популяций эритроцитов периферической крови и ранней диагностики анемического синдрома. Для выполнения одной из задач данной цели был проведен корреляционный анализ данных по морфоцитометрии эритроцитов 18 больных с ХП и 22 больных с ХПН, полученных на компьютерном анализаторе клеточного изображения Аспек.

Корреляционный анализ проводили с помощью непараметрического коэффициента связи Спирмена отдельно для трех групп эритроцитов - нормо-, микро- и макроцитов по следующим 12 показателям (v): площадь (v2) и периметр (v3) эритроцита, фактор 1 (v4) и фактор 2 (v5) формы эритроцитов, количество гемоглобина в одном эритроците (v6), коэффициент корреляции между v2 и v6 (v7), процент клеток с количеством гемоглобина <20 пг (v8), 20-26 пг (v9), 27-35 пг (v10), 36-пг (v11), >40 пг (v12), возраст больного (v13). В дальнейшее рассмотрение были взяты только те показатели, между которыми была обнаружена статистически достоверная связь (р<=0,05). Были получены следующие результаты.

Общее количество статистически достоверных корреляционных связей (КС) между разными показателями для больных с ХП равнялось внутри группы нормоцитов - 13, микроцитов - 7, макроцитов - 14. Для больных с ХПН эти числа соответственно равнялись 14, 18 и 14. Видно, что число КС существенно менялось только в группе микроцитов по сравнению с нормо- и макроцитами. Это могло указывать на нестабильность внутриклеточных связей в данной группе эритроцитов.

Показано, что спектр КС менялся в зависимости от принадлежности эритроцита к нормо, микро- или макроцитам в обеих группах больных.

Кроме того, в зависимости от размера эритроцита и заболевания КС между одинаковыми показателями могла быть как положительной, так и отрицательной разной степени выраженности. Это свидетельствовало в пользу того, что размер эритроцитов может определять взаимоотношения взятых показателей.

Кроме ожидаемых КС как, например, v2-v3 (r=0,70-0,80), были выявлены и менее ожидаемые. В частности, у больных с ХП в группе нормоцитов были выявлены такие КС: v3-v7 (r=-0,52), v4-v10 (r=0,54), v6v8 (r=-0,51), v6-v9 (r=-0,91), v6-v11 (r=0,89), v6-v12 (r=0,83); v9-v(r=0,53); в группе микроцитов: v2-v4 (r=0,63), v4-v9 (r=0,55), v5-v7 (r=0,57), v6-v8 (r=-0,76), v6-v10 (r=0,68), v11=v13 (r=0,61); в группе макроцитов: v2v7 (r=0,53), v3-v4 (r=-0,60), v3-v7 (r=0,51), v6-v8 (r=-0,65), v6-v9 (r=-0,78), v6-v11 (r=0,68), v6-v12 (r=0,73), v7-v12 (r=0,67). У больных с ХПН в группе нормоцитов были выявлены следующие КС: v3-v4 (r=-0,55), v4-v8 (r=0,46), v6-v8 (r=-0,54), v6-v9 (r=-0,91), v6-v11 (r=0,75); v6-v12 (r=0,91); v12v13 (r=0,43); в группе микроцитов: v2-v4 (r=0,73), v2-v6 (r=0,42), v2-v7 (r=0,53), v2-v8( r=-0,47), v4-v6 (r=0,46), v4-v7 (r=-0,54) v4-v8 (r=-0,65), v6-v(r=-0,86), v6-v10 (r=0,88), v6-v11 (r=0,77), v7-v8 (r=0,44), v7-v9 (r=-0,45); в группе макроцитов: v3-v4 (r=-0,64), v4-v10 (r=0,45), v6-v8 (r=-0,54), v6-v(r=-0,79), v6-v10 (r=-0,75), v6-v12 (r=0,97), v6-v13 (r=0,52), v9-v13 (r=-0,43), v12-v13 (r=0,53).

Таким образом, корреляционный анализ по взятым показателям нормо-, микро- и макроцитов выявил существенные статистические различия популяций эритроцитов периферической крови среди больных ХП и больных с почечной патологией, осложненной ХПН.

Кекало А.И., Никитин А.А., Малыченко Н.В., Галстян М.В., Оганесян И.Г.

МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У БОЛЬНЫХ СТАРШИХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП С ХРОНИЧЕСКИМИ СИАЛАДЕНИТАМИ ФГУ Российский геронтологический научно-клинический центр Росздрава, Москва МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского, Москва Хроническими сиаладенитами чаще страдают лица старших возрастных групп (77,4% от общего числа пациентов). Фоном развития хронического воспаления в слюнных железах является сниженный уровень факторов неспецифической защиты организма, который так же влияет и на активность патологического процесса. Цель настоящего исследования - оценка нарушений неспецифической резистентности у больных старших возрастных групп с хроническими сиаладенитами.

Обследовано 18 больных с хроническими сиаладенитами (средний возраст 61,3±6,9) и 10 практически здоровых добровольцев (средний возраст 58,5±6,6).

Морфофункциональное состояние нейтрофилов периферической крови оценивали методом витальной компьютерной морфометрии. Анализ морфометрических показателей проводили в динамике: до оперативного вмешательства и на 4 сутки после операции. Использованный в работе метод компьютерной фазовой морфометрии позволил одновременно исследовать и структуру и функцию циркулирующих нейтрофилов периферической крови. Мы анализировали геометрические (диаметр, периметр, площадь) и оптические (высота, объем) параметры живых нейтрофилов (каждой клетки в отдельности и всей популяции в целом).

Функциональную активность клеток оценивали по изменению морфологической структуры нейтрофилов, дифференцируя неактивные клетки, активные и дегенеративные, т.е. исчерпавшие свой функциональный резерв.

Анализ результатов показал, что содержание морфологических типов нейтрофилов в циркулирующей популяции у практически здоровых лиц составило: 19,7% - неактивные клетки, 71,2% - функционально активные, а 9,1% - дегенеративные. У больных хроническими сиаладенитами в стадии обострения процент неактивных и активных нейтрофилов снизился до 16,3% и 69,2%, соответственно. Количество дегенеративных клеток увеличивалось до 14,5%. На 4-5 сутки после оперативного и консервативного лечения число неактивных нейтрофилов составило 15,2%, функционально активных клеток – 74,3%, а дегенеративных - 10,5%.

у больных хроническими сиаладенитами в стадии обострения морфометрические параметры циркулирующих нейтрофилов имели тенденцию к незначительному увеличению по сравнению с практически здоровыми лицами соответствующего возраста. Средние в популяции диаметр, периметр и объем клеток были увеличены на 4-5% (p>0,05), а средние значения площади нейтрофилов достоверно превышали показатели нормы на 14% (p<0,05). На 4-5 сутки после оперативного лечения были получены неоднозначные результаты: у большинства пациентов отмечалось достоверное увеличение средних значений площади и объема циркулирующих клеток. Не исключено, что эти изменения были связаны с реакцией организма на оперативное вмешательство.

Полученные результаты позволяют констатировать, при хронических сиаладенитах состояние клеточного звена неспецифического иммунитета можно рассматривать как состояние напряжения. При этом уровень неспецифической защиты организма может быть количественно и качественно оценено с помощью экспресс-метода компьютерной морфометрии клеток.

Ковалева Л.Г., Василенко И.А., Колосова Е.Н., Кастрикина И.С.

ОЦЕНКА ТРОМБОЦИТАРНОГО ЗВЕНА ГЕМОСТАЗА МЕТОДОМ КОМПЬЮТЕРНОЙ МОРФОМЕТРИИ ТРОМБОЦИТОВ ПРИ ИДИОПАТИЧЕСКОЙ ТРОМБОЦИТОПЕНИЧЕСКОЙ ПУРПУРЕ ГУ Гематологический научный центр РАМН, Москва, Россия ФГУ РГНКЦ Росздрава, Москва, Россия Идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП) - аутоиммунное заболевание, характеризующееся нарушением толерантности к собственным антигенам тромбоцитов, их функциональной несостоятельностью и количественным дефицитом. До недавнего времени морфологию тромбоцитов оценивали в основном с помощью световой микроскопии, которая не позволяла с достаточной точностью регистрировать детальные изменения их структуры и функции. С появлением современных компьютерных технологий принципиальным образом расширились возможности изучения тромбоцитарного гемостаза в норме и при развитии патологических состояний. Поэтому не вызывает сомнения, что получение новых и информативных данных путм исследования морфофункционального состояния тромбоцитов может способствовать изучению особенностей патогенеза данного заболевания.

Отделением стандартизации методов терапии ГНЦ РАМН совместно с лабораторией компьютерной цитоморфометрии ФГУ РГНКЦ Росздрава обследовано 25 пациентов с диагнозом идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура в возрасте от 29 до 69 лет.

Морфофункциональное состояние тромбоцитов периферической крови оценивали методом компьютерной фазометрии (КФМ), определяя размерные показатели и активационный статус каждой клетки в отдельности и всей популяции в целом, дифференцируя тромбоциты «покоя», клетки с низким, высоким уровнем активности и дегенеративные формы. Параллельно у всех пациентов анализировали количество тромбоцитов, данные коагулограммы, результаты исследования костномозгового кроветворения, уровень антитромбоцитарных антител.

У больных ИТП зарегистрировано достоверное увеличение средних в циркулирующей значений диаметра, периметра, площади и объема тромбоцитов на 26, 21, 72 и 23% при снижении фазовой высоты клеток на 8% по сравнению с показателями соматически здоровых лиц.

Активационный статус тромбоцитов при ИТП оказался незначительно повышенным за счт увеличения процента активированных клеток (преимущественно с низким уровнем активности). Обращало на себя внимание отсутствие дегенеративно-измененных форм тромбоцитов (в норме составляющих около 5%). При проведении корреляционного анализа была установлена прямая зависимость между уровнем антитромбоцитарных антител и активационным статусом тромбоцитов периферической крови.

Таким образом, морфометрический анализ позволяет оценивать количественные и качественные изменения циркулирующих тромбоцитов с достаточной степенью объективности и информативности, что может способствовать улучшению диагностики, оценки тяжести заболевания, своевременному назначению терапии и изучению патогенетических особенностей ИТП.

Красников А.В, Погорелов В.М.

АЛГОГИТМ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ЦИТОХИМИЧЕСКОЙ РЕАКЦИИ НА МИЕЛОПЕРОКСИДАЗУ У НЕЙТРОФИЛОВ.

Гематологический Научный Центр, Москва Одним из необходимых условий эффективности современной диагностики и лечения ряда заболеваний является максимально точное и достоверное знание морфо-функциональных характеристик клеток и их составляющих. Значимость этих данных определяется той диагностической ценностью, какими являются функциональная полноценность лейкоцитов оцениваемая с помощью цитохимических реакций на биологически активные компоненты клетки. Среди них особое место занимает наиболее точная оценка наличия и количества миелопероксидазы (МП). В настоящее время, как правило, используется полуколичественная оценка результатов цитохимической реакции, с вычислением среднего цитохимического коэффициента по формуле Кеплоу. Предлагается методика получения объективного, не зависящего от исследователя результата.

Алгоритм количественного определения результатов данной цитохимической реакции на МП состоит в интегральном определении степени заполненности, как отношение площади МП к общей площади клетки. Данный алгоритм, в отличие от морфологичесеой обработки изображения (сегментация, выделение контуров внутриклеточных элементов) предсталяется более устойчивым и надежным ввиду малого количества элементов (пикселей) получаемого изображения клетки.

Одним из наиболее распространенных методов обработки цветных цифровых изображений является разложение по цветовым плоскостям с дальнейшей обработкой в градациях серого цвета.

Физически получаемое изображение представлено в RGB (red,green,blue) цветовом пространстве, но более адекватным для восприятия глазом является HSB (Hue,Saturation, Brigtness) ю Было определено, H-слой адекватно разделяет на клетке МП. В дальнейшем строилась гистограмма яркости в grey- градациях, которая показывает пик, площадь которого соответствуюет содержанию МП в клетке Данная гистограмма апроксимировалась бинормальным распределением с вычислением его параметров, вычисление площади путем интегрирования и определение степени заполненности МП при цитохимической реакции.

Краснова Л.С., Погорелов В.М., Дягилева О.А., Наумова И.Н.

МОРФОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПОПУЛЯЦИЙ БЛАСТНЫХ КЛЕТОК ПРИ ОСТРЫХ МИЕЛОИДНЫХ ЛЕЙКОЗАХ Учреждение Российской Академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН, Москва Индивидуальная и внутригрупповая вариабельность цитологических признаков лейкозных клеток до конца не изучена. А с введением новых комплексов цитостатических средств, с появлением длительных ремиссий, сменяемых рецидивами, рефрактерными к ранее эффективным цитостатическим препаратам, стала очевидна изменчивость в первую очередь формы и величины ядер и цитоплазмы лейкозных клеток.

В этой связи, проведен компьютерный морфометрический анализ бластных клеток в норме и при различных вариантах острых миелоидных лейкозов (ОМЛ). Предварительно были отработаны протоколы пробоподготовки получения монослойных препаратов периферической крови и костного мозга на предметных стеклах с помощью центрифуги [Л.С.Краснова и соавт., 2007]. Всего было обследованно 44 пациента с ОМЛ в дебюте заболевания. Контрольную группу составили 8 доноров гемопоэтических клеток. От каждого человека выборку составляли из бластных клеток. Сравнительный анализ полученных морфометрических характеристик бластных клеток всех вариантов ОМЛ с «контрольной группой» показал, что почти все основные морфометрические параметры имеют достоверные различия в средних значениях. Средние значения площади бластных клеток костного мозга при вариантах М0 и Мувеличены в среднем на 16,5% по сравнению с бластными клетками здоровых людей, при варианте М3 – на 18,6%, при варианте М5 – на 25,2%, а при вариантах М2 и М4 эти значения уменьшены на 13,4% и 11,1% соответственно. Средние значения площади ядер бластных клеток при варианте М0 превышают средние значения ядер «контрольной группы» в среднем на 7,5%, при М1 – на 23,0%, при М5 – на 12,7%, а при М2 и М4 –имеют меньшие значения на 16,9% и 12,9%. Интересно отметить, что средние значения ЯЦС имеют достоверные различия при всех вариантах ОМЛ, кроме М4. Процент бластных клеток с неправильной формой ядра увеличивается по мере их созревания, а именно от Мварианта к М3. Сравнительный анализ средних значений площадей и ЯЦС бластных клеток показал отсутствие достоверных различий между вариантами М0 и М3, а также М2 и М4. Это объясняется тем, что популяции бластных клеток вариантов М0 и М3 представлены в основном мезо- и макрогенерациями, а популяции М2 и М4 максимально гетерогенны по размерам бластных клеток. Однако, средние значения площадей ядер клеток и их факторов формы 1 и 2 этих вариантов достоверно отличались. Популяция варианта М5 отлична от всех и, в основном, представлена макрогенерациями.

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 11 |






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.