WWW.DISSERS.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

   Добро пожаловать!


Pages:     | 1 |   ...   | 9 | 10 ||

Данные по исследованию иммунологических показателей больных БА с разной степенью тяжести до и после проведения ФГТСС представлены в таблице.

Табл.1. Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов ПК при БА Средняя степень тяжести Тяжелая степень БА БА N=20 N=10 Практически Показатель До После До После здоровые лица проведения проведения проведения проведения N =ФГТСС ФГТСС ФГТСС ФГТСС CD3+ % 71,4+- 1,9 68,0+-2,8 * 65,4+-5,2 59,2+-9,2 73,9+-1,CD3+CD4+ 43,6+-1,9 39,8+-1,9 48,0+-1,8 40,5+-4,6 45,9+-1,% CD3+CD8+ 24,2+-3,3 25,2+-3,5 17,2+-3,5 * 17,5+-5,6 30,3+-1,% ИРИ CD4+/ 1,94+-0,27 ** 1,7+-0,23 3,18+-0,55 * 2,82+-0,59 * 1,6+-0,CD8+ CD19+, % 11,8+-2,3 11,8+-2,4 10,8+-2,4 10,2+-2,3 10,2+-0,CD311,0+-1,4 * 14,0+-2,6 18,6+-4,0 24,7+-8,3 15,4+-1,CD16+56+ % CD3+HLA3,0+-1,2 * 7,2+-2,0 ** 2,3+-0,3 * 5,7+-1,7 6,3+-0,DR+ % Примечание: * - достоверные различия со значениями практически здоровых лиц;

** - достоверные различия с показателями пациентов другой группы У больных БА были выявлены следующие существенные нарушения в системе клеточного иммунитета: снижение относительного содержания Т– популяции (CD3+), Т–цитотоксической субпопуляции (CD3+CD8+) лимфоцитов, резкое снижение числа CD3+HLA-DR+- клеток, особенно выраженное у пациентов с тяжелой степенью заболевания (р<0,001) до применения комплексной терапии и ФГТСС. Степень выраженности нарушений коррелировало со степенью тяжести патологического процесса.

В результате лечения были отмечены: 1) иммуномодулирующий эффект ФГТСС на количественные параметры Т-клеточной системы иммунитета (снижение до нормы исходно повышенных показателей); 2) стимулирующий эф-фект ФГТСС на экспрессию HLA-DR-антигена на Т- клетках (нормализация или увеличение числа активированных Т – лимфоцитов); 3) увеличение количества естественных клеток-киллеров (CD3-CD16+56+), причем для пациентов со среднетяжелым течением БА в 50% случаев была характерна высокая степень экспрессии маркеров CD16+CD56+, определяемая по величине среднего канала интенсивности флюоресценции (MFI). Оценка степени экспрессии маркера CDпредставляется важной, т.к. отражает функциональную активность ЕКК.

Содержание популяции лимфоцитов CD3+CD16+56+ (истинные NKT- клетки и Т- клетки, экспрессирующие СD56), у больных БА составило 3,5+- 1,0%, при норме от 3% до 10%. Клиническое значение данной популяции лимфоидных клеток в настоящее время изучено недостаточно.

Шабалина Е.В.*, Милаев В.Б.*, Сухенко Е.П.**, Кузнецов С.И.** НЕКОТОРЫЕ ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ АКНЕ У СОБАК.

* ФГОУ ВПО Ижевская ГСХА, Ижевск ** НТУ «Инженерно-технический центр», Ижевск Несколько лет назад была разработана методика оперативной диагностики эндотоксикозов в гуманитарной медицине по измеренным вручную электрокинетическим показателям клеток крови. В данной работе мы применили эту методику при контроле терапии акне собак через оценку указанных показателей, ориентируясь на сопровождающую данное заболевание интоксикацию. Исследование проводилось с помощью нового автоматизированного аналитического комплекса «Цито-Эксперт», разработанного и производимого НТУ «Инженерно-технический центр» (г.

Ижевск). Комплекс включает в себя электрофоретическую камеру с исполнительным блоком, микроскоп с цифровой окулярной видеокамерой WEBBERS MYscope 130M и компьютер с оригинальным пакетом программ NTUComplex.

Опыт проводили на 18 беспородных собаках 1,5 – 2-летнего возраста, подобранных по принципу аналогов. Было сформировано группы по 6 животных в каждой: группа клинически здоровых животных, послужившая контролем, первая и вторая опытные – собаки с диагнозом акне.

Акне - болезнь, характеризующаяся воспалением сальных желез и образованием гнойничков различной величины, чаще носит хронический рецидивирующий характер Собак первой опытной группы мы лечили медикаментозно по общепринятой методике путем парентерального введения дексаметазона (4мг/животное 1 раз в 3 дня), гамавита и местной обработки монклавитом.

Собакам второй опытной группы дополнительно проводили прямое электрохимическое окисление крови с помощью устройства для его осуществления. Оно предназначено для лечения эндогенной и экзогенной интоксикации, обусловленной накоплением различных токсических веществ. Происходит прямое электрохимическое окисление крови и непосредственно в кровеносном русле синтезируется гипохлорит натрия из натрия хлорида плазмы, оказывающий антитоксическое действие. Для этого в полость латеральной подкожной вены предплечья вводили проводник, выполненный из платиновой проволоки. На кожный покров у концевых участков проводника накладывали два разнополярных электрода, которые соединялись с источником постоянного тока, и пропускали ток силой в 3 мА в течение 15 минут. Осуществляли процедуры десятикратно через день.

Эффективность лечения мы оценивали по цитологическим параметрам, полученным с помощью комплекса «Цито-эксперт».

Результаты опыта изложены в таблице 1.

Данные токсикоза, полученные с помощью комплекса «Цитоэксперт», по нашему мнению, позволяют объективно и адекватно оценивать состояние больного животного, назначать эффективное лечение и осуществлять его мониторинг для своевременной коррекции.

Таблица 1. Динамика электрокинетической активности эритроцитов у собак при лечении акне разными способами (Р<0,001).

Группы До Через 14 После лечения Показатели животных лечения суток (через 28 суток) Контроль 13,69±0,Амплитуда колебаний 1 опытная 7,9±0,40 9,5±0,66 10,6±0,эритроцитов, группа мкм 2 опытная 8,0±0,46 10,3±0,71 13,8±0,группа Контроль 96,5±0,Доля подвижных 1 опытная 64,5±0,55 73,5±0,73 81,2±0,эритроцитов, группа % 2 опытная 64,0±0,4 81,5±0,79 96,0±0,группа Шмаров Д.А., Кучма Ю.М., Козинец Г.И.

ДНК-ЦИТОМЕТРИЯ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПРИ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗАХ Гематологический научный центр РАМН, Москва Главный военный клинический госпиталь имени академика Н.Н.Бурденко, Москва Исследованы параметры клеточного цикла клеток костного мозга, миелограммы и показатели клеточного состава периферической крови у первичного больного острым миелобластным лейкозом (ОМЛ), а также 137 случаев в стадии полной гематологической ремиссии и 23 случая рецидива.

Клетки костного мозга у людей получали при помощи пункции, окрашивали бромистым этидием (0,05 г/л).и хромомицином А3 (0,05 г/л красителя в 0,1 моль/л трис-буфере, содержащем 0,1 моль/л хлорида натрия, 7,5 ммоль/л хлорида магния, рН 7,4). Непосредственно перед измерением полученную взвесь инкубировали с рибонуклеазой А в конечной концентрации 0,05 г/л в течение 20 мин при комнатной температуре.

Измерения проводили на проточном цитофлуориметре EPICS-С (Coulter Electronics, США) при длине волны возбуждения 458 нм. Для анализа ДНК-гистограмм с получением оценок распределения клеток по стадиям клеточного цикла (S, G2+М, G1/0) применяли модифицированный SFIT-метод (Dean, 1980). Изучение морфологии клеток костного мозга с подсчетом миелограммы проводили на препаратах, окрашенных по Романовскому.

Выявлена функциональная гетерогенность бластных клеток у пациентов с ОМЛ по уровню их пролиферативной активности. Было установлено, что всех пациентов можно разделить на 2 группы, с высоким и низким уровнем пролиферативной активности миелокариоцитов. Если в норме доля миелокариоцитов в стадии синтеза ДНК в среднем составляет 12,3% и варьирует в сравнительно узких пределах, то при ОМЛ наблюдалось довольно четкое разделение на две популяции. В первой группе доля клеток в S-фазе варьировала от 12,2 до 16,7% (>12%), во второй - 2,7 до 10,2% (<12%). Было установлено, что пациенты с высоким уровнем пролиферативной активности бластных клеток имеют значительно более низкие прогностические показатели по сравнению со второй группой. Установлено, что вероятность ремиссии после 1 курса химиотерапии 7+3 в первой группе была значительно ниже и составляла около 17%.

Вероятность ремиссии после химиотерапии во второй группе в среднем составляла 60%. При цитометрии клеток костного мозга у пациентов в ремиссии отмечалась положительная корреляция между долей клеток в стадии синтеза ДНК и содержанием клеток эритроидного ряда. В случаях рецидива форма зависимости имело иной характер, связанный с подавлением пролиферации эритроидного ростка лейкозными клетками.

На интегральные показатели пролиферации, получаемые при цитометрическом анализе клеток костного мозга, большое влияние оказывает примесь клеток эритроидного ряда, которые могут существенно завышать данные. Чтобы избавиться от возникающей ошибки, нами была разработана математическая формула, при помощи которой можно проводить коррекцию этих влияний.

Таким образом, нами у пациентов с ОМЛ по показателям ДНКцитометрии выявлены различия в уровне пролиферативной активности лейкозных клеток, которые имеют связь с клиническими, клиниколабораторными данными и могут иметь прогностическое значение.

На интегральные показатели пролиферации, получаемые при цитометрическом анализе клеток костного мозга, большое влияние оказывает примесь клеток эритроидного ряда, которые могут существенно завышать данные. Чтобы избавиться от возникающей ошибки, нами была разработана математическая формула, при помощи которой можно проводить коррекцию этих влияний. В группе 2Б выявлена положительная корреляция (R=0,737, n=8) между абсолютным содержанием бластов и соотношением S/(G2+M), что, вероятно, свидетельствует о нарушениях пролиферации, связанных с возрастанием опухолевой массы. В этой же группе выявлена отрицательная корреляция между коэффициентом вариации пика G1 (R=0,95, n=7) и абсолютным содержанием бластов.

Анализируя клинические данные мы неожиданно обнаружили, что такой показатель, как длительность периода от начала заболевания до постановки окончательного диагноза самая большая именно во 2А группе.

У отдельных больных этот период превышал 150 дней. При этом пролиферативная активность клеток снижалась, уменьшался и гемоглобин.

Корреляционные кривые двух этих показателей были практически идентичны. В этой ситуации статистика дает 2 объяснения: либо один процесс зависит от другого, либо оба процесса имеют зависимость от некого третьего фактора. Поскольку этого фактора выявить не удается, наиболее вероятной причиной полож. корреляции гемоглобина и S-фазы является более высокие значения гемоглобина при коротком диагностическом периоде.

Щербакова Э.Г., Баранов В.И., Василенко И.А., Метелин В.Б., Воробьева Л.С., Сопова Е.А.

ВЛИЯНИЕ НАНОЧАСТИЦ ВОЛЬФРАМА НА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ МОНОНУКЛЕАРОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ КРЫС Российская медицинская академия последипломного образования, Москва Активное развитие нанотехнологий, создание и использование наноструктурированных веществ позволяет перейти на новые уровни в развитии науки и техники, что революционным образом меняет пути развития многих направлений жизни человека. Материалы, полученные с использованием нанотехнологий, находят применение в микроэлектронике, энергетике, химической и пищевой промышленности, медицине и т.д. Однако ввиду того, что наночастицы обладают особыми физико-химическими свойствами, определяемыми их сверхвысокой дисперсностью, нельзя исключить наличие у них и специфического биологического, в том числе токсического действия. Поэтому в ходе реализации научно-технических мероприятий по созданию и использованию наночастиц и наноматериалов необходима проводить оценку риска их возможного негативного воздействия на клетки живого организма (человека и животных).

Цель настоящего исследования – оценить влияние наночастиц вольфрама на морфофункциональное состояние мононуклеаров периферической крови экспериментальных животных (крыс).

В экспериментах использовали 18 крыс (средняя исходная масса 240260 грамм), которых разделили на 4 группы: животным в 1 группе однократно интрагастрально был введен промышленно выпускаемый вольфрам (W) с размером частиц 1,2 мкм (5 мл каждой крысе с концентрацией взвеси 2мг/мл); животным 2 группы – нанопорошок вольфрама (нано-W60), полученный плазменным методом, с размером частиц 60 нм (5 мл каждой крысе с концентрацией 2мг/мл); животным группы - нанопорошок вольфрама (нано-W25), полученный плазменным методом, с размером частиц 25 нм (5 мл каждой крысе с концентрацией взвеси 2мг/мл); 4 группу составили интактные крысы. Забор крови производили через 72 часа после введения. Исследования морфофункционального состояния мононуклеаров (до 100 клеток от каждой крысы) проводили на базе отечественного компьютерного лазерного фазово-интерференционного микроскопа Цитоскан (МГИРЭА, Москва). Оценивали геометрические (диаметр (D), периметр (P), площадь (A)), и фазовые (высота (H), объма (V)) показатели каждой клетки и всей выборки в целом. Статистический анализ экспериментальных и клинических данных проводили с помощью алгоритмов среды MatLab и математического пакета "Statistica 6".

Таблица 1.

Результаты морфометрического анализа мононуклеаров периферической крови крыс (М ).

Группы D, мкм P, мкм H, мкм S, мкм2 V, мкмW 6,6 1,1 19,3 3,3 1,9 0,5 28,3 10,3 23,7 10,W60 6,1 1,5* 17,3 3,9 1,9 0,4 23,2 11,0 19,5 10,W25 6,5 1,8 19,5 5,2 2,1 0,5* 26,9 13,9 26,7 17,1* Контроль 6,4±1,2 18,7±3,4 1,6±0,3 25,0±9,3 18,3±7,* - достоверность различий (р<0,05) Является очевидным, что под влиянием W изменялись все средние в популяции морфометрические параметры мононуклеаров. Увеличение D, P, S связаны с возрастанием в циркуляции количества клеток большего размера (моноцитов, цитотоксических лимфоцитов). Повышение значений Н и V, отражающих оптические свойства ядра, свидетельствует о плотности упаковки хроматина и, следовательно, подавлении функциональной активности мононуклеаров.

Аналогичные изменения наблюдались в группах нано-W60 и наноW25. Однако нанопорошок вольфрама с размером частиц 25 нм вызывал более выраженный супрессивный эффект: высота клеток увеличивалась более чем на 30% по сравнению с показателями контрольной группы.

Таким образом, морфометрический анализ динамики клеточных показателей продемонстрировал наличие выраженного супрессивного действия наночастиц вольфрама. При этом нанодисперсный вольфрам оказался способным к более интенсивному взаимодействию с функциональными компонентами клеток (мембранами, органеллами, ядерными структурами). Детальное изучение характера этих взаимодействий может стать основой создания системы норм безопасности производства и применения нанотехнологий нового поколения.

Radu Marin, Radu Florica, Radu Valentin, Radu Daniela METHOD OF MAKING A BIOINFORMATIK SYSTEM TO CONTROL HUMAN CELL PROLIFERATION AND RESULTED SYSTEM Research centre for molecular materials and membranes – center of tehnological transfer, Bucharest, Romania This invention refers to a method of making a bioinformatik system to control human cell proliferation and to a system developed by this method to allow the improvement of medical care for patients with proliferative dysfunctions or in need of structural or/and functional regeneration of tissues or/and organs affected by toxic, infectious or traumatic factors, using artificial intelligence and directed metabolism.

We were worked up complex of expert system: expert system for the control of cells proliferation and therapeutic optimization; expert system for the monitoring of the affected organ; txpert system for the monitoring of the immunity in conjunction with the metabolic processes, including expert subsystem for the monitoring of the epurative system(b1), expert subsystem for the monitoring of the cardiovascular system (b2), expert subsystem for the monitoring of the neuroendocrine system (b3).

Expert system B for the monitoring of the vital organs including at least three subsystems:

B1 expert subsystem for the monitoring of the neuroendocrine system;

B2expert subsystem for the monitoring of the cardiovascular system;

B3expert subsystem for the monitoring of the epurative system;

Expert system C for the monitoring of the immunity in conjunction with the metabolic processes;

Expert system D for the control of cells proliferation therapeutic optimization which is in a one-to-one relationship with the other three expert systems mentioned above: A, B, C and with the experts users and common, external to the bioinformatik system.

Для заметок.

НАУЧНОЕ ИЗДАНИЕ Материалы II Московской региональной научно-практической конференции (c международным участием) ЦИТОМОРФОМЕТРИЯ В МЕДИЦИНЕ И БИОЛОГИИ:

ФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ И ПРИКЛАДНЫЕ АСПЕКТЫ Технический редактор Метелин В.Б.

Pages:     | 1 |   ...   | 9 | 10 ||






© 2011 www.dissers.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.